38.(10分)生物技术实践
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于
水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生
,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠
作为底物,活性可用一定条件下单位时间 表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图:
Ⅰ中的主要成分为
;Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
(3)为建设基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循
环,每次循环包括三步:____ 。反应过程中打开模板DNA双链的方法是 。
(4)除植酸酶外,微生物还应用在 的生产中。
参考答案
(1) 透明圈 植酸钠的消耗量(肌醇和磷酸的生成量); (2) 小分子杂质 凝胶色谱法:根据蛋白质之间分子大小,吸附性质等差异进行纯化。(或电泳法:根据蛋白 质之间电荷,分子大小等差异进行纯化。); (3) 变性,复性,和延伸 加热; (4) 蛋白酶,脂肪酶,纤维素酶