20. 以我国科学家为主的科研团队将OSNL(即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写)导入黑羽鸡胚成纤维细胞(CEFs),诱导其重编程为诱导多能干细胞(iPS),再诱导iPS 分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs),然后将iPGCs 注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中,最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代,实验流程如图。回答下列问题。

(1)CEFs 是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的,为了获得单细胞悬液,鸡胚组织剪碎后需用处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加 等天然成分,以满足细胞对某些细胞因子的需求。
(2)体外获取OSNL 的方法有 (答出1种即可)。若要在CEFs 中表达外源基因的蛋白,需构建基因表达载体,载体中除含有目的基因和标记基因外,还须有启动子和 等。启动子是 识别和结合的部位,有了它才能驱动
(3)iPS 细胞和 $\mathrm { i } \mathrm { P G C s }$ 细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是 。
(4)诱导iPS 细胞的技术与体细胞核移植技术的主要区别是
(5)该实验流程中用到的生物技术有 (答出2点即可)。
(1) ①. 胰蛋白酶、胶原蛋白酶等; (2) 动物血清 (2) ①. PCR 技术、人工合成法 ②. 终止子; (3) RNA 聚合酶; (4) 目的基因转录出mRNA,最终表达出所需要的蛋白质 ## (3)基因的选择性表达 (4)诱导 iPS 细胞的技术是将已经分化的细胞诱导为类似胚胎干细胞的一种细胞(iPS),再诱导 iPS 分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs)的技术,而细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞内,使这个重组的细胞发育为胚胎,继而发育为动物个体的技术; (5) 基因工程、动物细胞培养