纤毛是广泛存在的细胞表面结构，功能异常可引起多种疾病。因此…——2022 高考生物第 24 题答案解析

24. 纤毛是广泛存在的细胞表面结构，功能异常可引起多种疾病。因此，研究纤毛形成的作用机制具有重
要意义。请回答下列问题。
（1）纤毛结构如图 1 所示，由细胞膜延伸形成的纤毛膜主要由中心体转变而来，中心体在有丝分裂中的
功能是__________________。

（2）某病人肾小管上皮细胞纤毛异常，为了分析纤毛相关基因 X 是否发生了变异，对基因 X 进行了 PCR
扩增与产物测序。从细胞样品中分离 DNA 时，可通过交替调节盐浓度将与核蛋白结合的DNA 分离出来，
溶液中添加 NaC1 至 2．0mo1/L 的目的是__________________。PCR 扩增时，需在__________________催
化下，在引物__________________端进行 DNA 链的延伸，获得扩增产物用于测序。
（3）为研究蛋白质 X 在细胞中的定位，构建绿色荧光蛋白 GFP 与 X 的融合蛋白，融合蛋白具有绿色荧
光，可示其在细胞内位置。将 X-GFP 基因融合片段 M 导入如图Ⅱ所示载体质粒 Y，构建 Y-M 重组质粒
（在 EcoRⅤ位点插入片段） 。请完成下表。

分步实验目标 简易操作、结果、分析
PCR 鉴定正向重组质粒 Y-M（图Ⅱ
中融合片段 M 中有白色的箭头，代
表方向）
①选择图Ⅱ引物_____________；
②PCR 目的产物约为_____________bp。
确保M 及连接处序列正确，Y-M 的
连接处上游含有 Hind III+EcoR V 的
识别序列，下游含有 EcoR V+BamH
I 的识别序列
③质粒测序，图Ⅲ中正确的是____________（选填序列编号）
检测融合蛋白定位
④对照质粒 Y-GFP（仅表达 GFP）与实验质粒 Y-M 分别导入细
胞，发现对照组整个细胞均有绿色荧光，而实验组荧光集中在纤
毛基部，说明________________________。
（4）为研究另一纤毛病相关基因 Z 表达的变化，采用荧光定量 PCR 法检测健康人与病人基因 Z 的转录水
平。采集样本、提取总 RNA，经_____________形成 cDNA 作为模板，PCR 扩增结果显示，在总 cDNA 模
板量相等的条件下，健康人 Ct 值为 15，而病人 Ct 值为 20（Ct 值是产物荧光强度达到设定阈值时的PCR
循环数） 。从理论上估算，在PCR 扩增 20 个循环的产物中，健康人样品的目的产物大约是病人的
_____________倍。