31. (6分)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液
从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不
同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支
试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
试管编号
项目
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ V Ⅵ
蒸馏水(mL) 2 O 1 1 1 1
缓冲液(mL) 0 2 1 0.5 0.5 0.5
果胶酶液(mL) O 0 O 0.5 O 0
蜗牛酶液(mL) O 0 O O 0.5 0
纤维素酶液(mL) 0 O 0 O 0 0.5
实验结果 ﹣ ﹣ ﹣ +++ ++++ ++
(绿色深浅程度)
(注:“+”越多表示绿色越深,“一”表示颜色无显著变化)
(1) 实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效
果 ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2) 从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 果胶酶和纤
维素酶 等多种酶。该实验中 I、Ⅱ、Ⅲ 是空白对照组,其设置意义是 排除无
关变量的干扰 。
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 等渗溶液 洗涤。
(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是 低渗涨破法 。
(1)为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果