将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠…——2011 高考生物第 6 题答案解析

答案：C
解析：本题考查有关基因工程相关知识。获取目的基因是实施基因工程的第一步。其中
主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基
因。基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也
是基因工程的核心。将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重
新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出
现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏

性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。将切下的目的基因的
片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之
间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而
将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。将目的基因导入受体细
胞是实施基因工程的第三步。目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其
遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。已经表达了
就说明导入成功。所以A、B和D正确，C错误。