2024_山东卷 (生物)
5. 制备荧光标记的 DNA 探针时，需要模板、引物、DNA 聚合酶等。在只含大肠杆菌 DNA 聚合酶、扩增
缓冲液、H2O 和 4 种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP 和碱基被荧光标记的 dATP）的反应管①~④中，
分别加入如表所示的适量单链 DNA.已知形成的双链 DNA 区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条
件下不能产生小于 9 个连续碱基对的双链 DNA 区。能得到带有荧光标记的DNA 探针的反应管有
反应管 加入的单链 DNA
① 5'-GCCGATCTTTATA-3'3'-GACCGGCTAGAAA-5'
② 5'-AGAGCCAATTGGC-3'
③ 5'-ATTTCCCGATCCG-3'3'-AGGGCTAGGCATA-5'
④ 5'-TTCACTGGCCAGT-3'
A ①② B. ②③ C. ①④ D. ③④
D
【答案】D
【解析】
【分析】子链的延伸方向为 5'→3'，由题意可知，在本实验的温度条件下不能产生小于 9 个连续碱基对的
双链 DNA 区，要能得到带有荧光标记的 DNA 探针，需要能根据所提供的模板进行扩增，且扩增子链种含
有 A。
【详解】分析反应管①～④中分别加入的适量单链 DNA 可知，①中两条单链 DNA 分子之间具有互补的
序列，但双链 DNA 区之外的 3'端无模板，因此无法进行 DNA 合成，不能得到带有荧光标记的 DNA 探
针；②中单链 DNA 分子内具有自身互补的序列，由于在本实验的温度条件下不能产生小于 9 个连续碱基
对的双链 DNA 区，故一条单链 DNA 分子不发生自身环化，但两条链可以形成双链 DNA 区，由于 DNA
合成的链中不含碱基 A，不能得到带有荧光标记的DNA 探针；③中两条单链 DNA 分子之间具有互补的
序列，且双链 DNA 区之外的 3'端有模板和碱基 T，因此进行DNA 合成能得到带有荧光标记的 DNA 探
针；④中单链 DNA 分子内具有自身互补的序列，一条单链 DNA 分子不发生自身环化，两条链可以形成
双链 DNA 区，且双链 DNA 区之外的 3'端有模板和碱基 T，因此进行 DNA 合成能得到带有荧光标记的
DNA 探针。
综上，能得到带有荧光标记的 DNA 探针的反应管有③④。
故选 D。