人的 T 细胞可以产生某种具有临床价值的蛋白质（Y），该蛋…——2019 高考生物第 31 题答案解析

【答案】 ①. mRNA ②. 逆转录酶 ③. PCR ④. T-DNA ⑤. 整合到叶肉细胞染色体DNA上
⑥. 找到第6位氨基酸中的碱基所在的基因位置，参照密码子表，将第6位氨基酸甲的碱基替换为氨基酸
乙的碱基
【解析】
【分析】 基因工程的操作步骤 ： 获取目的基因（基因文库获取、PCR、人工合成等） ； 构建基因表达载体（含
目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点） ；把目的基因导入受体细胞（动物— 显微注射法；植物
— 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；微生物— 钙离子处理法） ；目的基因的检测和鉴定（分子水平
和个体水平） 。
【详解】 （1） 由于人的T 细胞可以产生蛋白质 Y，要获得Y 的基因，可从人的T 细胞中提取 mRNA 作为模
板，在逆转录酶催化下，利用四种游离的脱氧核苷酸合成 cDNA，再利用 PCR 技术（体外扩增 DNA 的技
术）在体外扩增获得大量 Y 的基因。

（2） 农杆菌转化法中，T-DNA 可以携带目的基因转移至受体细胞，并整合到受体细胞的的染色体DNA 上，
故需要 Y 的基因插入农杆菌Ti 质粒上的 T-DNA 中得到含目的基因的重组 Ti 质粒，把含目的基因的重组
Ti 质粒导入到农杆菌中，再让含目的基因的农杆菌侵染植物的叶肉细胞。若该叶肉细胞经培养、筛选等得
到了能稳定表达 Y 的愈伤组织，则说明Y 的基因已经整合到叶肉细胞染色体DNA 上。
（3）蛋白质工程需要从预期的蛋白质的功能出发，设计预期的蛋白质结构，推出相应的氨基酸序列，找到
相应的脱氧核苷酸序列，故对 Y 进行改造以提高其热稳定性，需要找到第 6 位氨基酸中的碱基所在的基因
位置，参照密码子表，将第 6 位氨基酸甲的碱基替换为氨基酸乙的碱基。
【点睛】天然蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的，即基因通过表达产生具有氨基酸序列的多肽链，
加工后形成具有高级结构的蛋白质，进而行使生物功能。蛋白质工程与之相反，它是从预期的蛋白质功能
出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列来进行改造。