4. 用氨苄青霉素抗性基因 $( \mathbf { A m p ^ { R } } )$ )、四环素抗性基因(Tet<sup>R</sup>)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA 片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是( )

参考答案
D
2023_省自主命题(湖北)
4. 用氨苄青霉素抗性基因 $( \mathbf { A m p ^ { R } } )$ )、四环素抗性基因(Tet<sup>R</sup>)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA 片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是( )

D
【答案】D
【解答】
【分析】图中质粒内,氨苄青霉素抗性基因(Amp<sup>R</sup>)内含有AcaI和PvuI 的酶切位点,四环素抗性基因(Tet<sup>R</sup>)内含有 HindIII、SphI 和 SalI 的酶切位点。【详解】A、若用HindⅢ酶切,目 基因可能正向插入,也可能反向插入,转录的产物可能不同,A 正的确。B、若用PvuⅠ酶切,重组质粒和质粒中都有四环素抗性基因(Tet<sup>R</sup>),因此在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不一定含有目的基因,B正确;C、DNA 凝胶电泳技术可以分离不同大小的DNA 片段,重组质粒的大小与质粒不同,能够鉴定重组质粒构建成功与否,C正确;D、SphⅠ的酶切位点位于四环素抗性基因中,若用SphⅠ酶切,重组质粒中含氨苄青霉素抗性基因$( \mathbf { A m p ^ { R } } )$ ),因此携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)的培养基中能形成菌落,在含Tet的培养基中不能形成菌落,D 错误。故选D。