22. 新城疫病毒可引起家禽急性败血性传染病,我国科学家将该病毒相关基因改造为 r2HN,使其在水稻胚
乳特异表达,制备获得 r2HN 疫苗,并对其免疫效果进行了检测。
回答下列问题:
(1)实验所用载体的部分结构及其限制酶识别位点如图 1 所示。其中 GtP 为启动子,若使 r2HN 仅在水稻
胚乳表达,GtP 应为________________启动子。Nos 为终止子,其作用为________________。r2HN 基因内
部不含载体的限制酶识别位点。因此,可选择限制酶________和________对 r2HN 基因与载体进行酶切,
用于表达载体的构建。
(2)利用________方法将 r2HN 基因导入水稻愈伤组织。为检测r2HN 表达情况,可通过 PCR 技术检测
________________,通过________技术检测是否翻译出 r2HN 蛋白。
(3)获得转基因植株后,通常选择单一位点插入目的基因的植株进行研究。此类植株自交一代后,r2HN
纯合体植株的占比为________。选择纯合体进行后续研究的原因是________________。
(4)制备 r2HN 疫苗后,为研究其免疫效果,对实验组鸡进行接种,对照组注射疫苗溶剂。检测两组鸡体
内抗新城疫病毒抗体水平和特异应答的CD8 T+细胞(细胞毒性 T 细胞)水平,结果如图 2 所示。据此分
析,获得的 r2HN 疫苗能够成功激活鸡的________免疫和________免疫。
(5)利用水稻作为生物反应器生产 r2HN 疫苗的优点是________________________________。 (答出两点
即可)
(1) ①. 水稻胚乳细胞; (2) 终止转录; (3) HindIII; (4) EcoRI (2) ①. 农杆菌转化 ②. r2HNmRNA ③. 抗原抗体杂交 (3) ①. 1/4 ②. 纯合体自交后代不发现性状分离 (4) ①. 体液 ②. 细胞; (5) 不受性别的限制、可大量种植、成本低、安全性高