21. 驹形杆菌可合成细菌纤维素(BC)并将其分泌到胞外组装成膜。作为一种性能优异的生物材料,BC
膜应用广泛。研究者设计了酪氨酸酶(可催化酪氨酸形成黑色素)的光控表达载体,将其转入驹形杆菌后
构建出一株能合成 BC 膜并可实现光控染色的工程菌株,为新型纺织原料的绿色制造及印染工艺升级提供
了新思路(图一)。
回答下列问题:
(1)研究者优化了培养基的_______(答两点)等营养条件,并控制环境条件,大规模培养工程菌株后可
在气液界面处获得 BC 菌膜(菌体和 BC 膜的复合物)。
(2)研究者利用 T7 噬菌体来源的 RNA 聚合酶(T7RNAP)及蓝光光敏蛋白标签,构建了一种可被蓝光
调控的基因表达载体(光控原理见图二 a,载体的部分结构见图二b)。构建载体时,选用了通用型启动子
PBAD(被工程菌 RNA 聚合酶识别)和特异型启动子PT7(仅被 T7RNAP 识别)。为实现蓝光控制染色,
启动子①②及③依次为________,理由是___________。
(3)光控表达载体携带大观霉素(抗生素)抗性基因。长时间培养时在培养液中加入大观霉素,其作用
为________________________(答两点)。
(4)根据预设的图案用蓝光照射已长出的 BC 菌膜并继续培养一段时间,随后将其转至染色池处理,发现
只有经蓝光照射的区域被染成黑色,其原因是_____。
(5)有企业希望生产其他颜色图案的 BC 膜。按照上述菌株的构建模式提出一个简单思路______。
(1) 碳源、氮源; (2) ①. PT7、PBAD 和 PBAD ②. 基因 2 和 3 正常表达无活性产物,被蓝光激活后再启动基因1 表达; (3) 抑制杂菌;去除丢失质粒的菌株; (4) 该处细胞中 T7RNAP 激活,酪氨酸酶表达并合成黑色素; (5) 将酪氨酸酶替换成催化其他色素合成的酶(或将酪氨酸酶替换成不同颜色蛋白)