21. 生态文明建设已成为我国的基本国策。水中雌激素类物质(E物质)污染会导致鱼类雌性化等异常,并通过食物链影响人体健康和生态安全。原产南亚的斑马鱼,其肌细胞、生殖细胞等存在E物质受体,且幼体透明。科学家将绿色荧光蛋白(GFP)等基因转入斑马鱼,建立了一种经济且快速的水体E物质监测
方法。
(1)将表达载体导入斑马鱼受精卵的最佳方式是
(2)为监测E物质,研究者设计了下图所示的两种方案制备转基因斑马鱼,其中ERE和酵母来源的UAS是两种诱导型启动子,分别被E物质-受体复合物和酵母来源的Gal4蛋白特异性激活,启动下游基因表达。与方案1相比,方案2的主要优势是 $\_$,因而被用于制备监测鱼(MO)。

(3)现拟制备一种不育的监测鱼SM,用于实际监测。SM 需经MO 和另一亲本(X)杂交获得。欲获得X,需从以下选项中选择启动子和基因,构建表达载体并转入野生型斑马鱼受精卵,经培育后进行筛选。请将选项的序号填入相应的方框中。Ⅰ.启动子:
①ERE②UAS③使基因仅在生殖细胞表达的启动子(P 生)④使基因仅在肌细胞表达的启动子(P 肌)Ⅱ.基因:A.GFP B.Gal4 C.雌激素受体基因(ER) D.仅导致生殖细胞凋亡的基因(dg)
(4)SM 不育的原因是:成体SM 自身产生雌激素,与受体结合后 $\_$造成不育。
(5)使拟用于实际监测 SM 不育的目的是的【答案】(1)显微注射
> (2)监测灵敏度更高 (3) ①. ② ②. D
> (4)激活ERE诱导Gal4表达,Gal4结合UAS 诱导dg表达,生殖细胞凋亡
> (5)避免转基因斑马鱼逃逸带来生物安全问题
(1) 显微注射; (2) 监测灵敏度更高; (3) ②; (4) 激活 ERE 诱导 Gal4 表达,Gal4 结合 UAS 诱导 dg 表达,生殖细胞凋亡; (5) 避免转基因斑马鱼逃逸带来生物安全问题