聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污…——2024 高考生物第 17 题答案解析

【答案】 （1） ①. 选择 ②. 水 ③. 无机盐 ④. 氮源
（2） ①. 基因工程（或转基因） ②. 限制酶 ③. DNA 连接酶 ④. 载体（或质粒）

（3）诱变育种 （4）不同平板中培养基量的差异以及平板内和平板间培养基厚度不均匀
【解析】
【分析】1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；
2、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品
活菌数目的方法是稀释涂布平板法。
【小问 1 详解】
方法 1 从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯为唯一碳源制备选择培养基，在该
培养基中只有能利用磷脂酰乙醇酯的微生物能生长，其他微生物的生长被抑制，进而获得筛选出所需要的
微生物，为了提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有水分、无机盐和氮源等营养物
质，同时还需要提供微生物生长所需要的外界环境条件。
【小问 2 详解】
方法 2 采用基因工程技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因，即
目的基因外，该技术还需要限制酶、DNA 连接酶和载体（或质粒）等“分子工具”，进而可以实现目的基因
表达载体的构建。
【小问 3 详解】
除了上述 2 种方法之外，还可以通过诱变育种技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微
生物，该该技术的原理是基因突变，由于基因突变具有不定向性，因而该技术具有盲目性。
【小问 4 详解】
将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白胨液体培养基中添加 2%的琼脂粉和适量的卵黄磷
脂）平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解
圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，即倒平板过程中没有经过定量
检测，且平板倒置的实际可能也会影响平板中培养基厚度的不同，因此不同平板中培养基量的差异以及平
板内培养基厚度不均匀以及平板间后代不均匀都会影响实验结果的判断，因此可采用降解圈的直径和菌落
直径的比值作为判断依据。