百合具有观赏、食用和药用等多种价值，科研人员对其进行了多种…——2024 高考生物第 23 题答案解析

【答案】 （1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 生长素和细胞分裂素
（2） ①. 花药离体培养 ②. 利用显微镜观察根尖有丝分裂中期细胞中染色体的数目
（3） ①. HindⅢ、BamHⅠ ②. 交链格孢 ③. 利用转基因技术将百合 B 中 L 基因的启动子替
换为野生百合中 L 基因的启动子 pL
【解析】
【分析】植物体细胞杂交的基本过程是：首先用酶解法获得原生质体，然后通过一定的技术手段如电刺
激、离心、振荡、聚乙二醇等诱导，实现原生质体的融合。只要将水解酶去除，融合的原生质体经培养
后，能很快再生出新的细胞壁，形成杂种细胞。杂种细胞具有全能性，经过培养能进一步分裂、分化，进
而发育成完整的植株。
【小问 1 详解】
因植物细胞细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，因此获得原生质体的方法是用纤维素酶和果胶酶对植物细
胞进行处理。得到原生质体后使原生质体融合，形成杂种细胞，再用生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织形
成和分化，从而获得完整的杂种植株。
【小问 2 详解】
获得单倍体植株的常用方法是花药（花粉）离体培养；鉴定百合单倍体植株的方法是利用显微镜观察根尖
有丝分裂中期细胞中染色体的数目，如果染色体数目减少一半，则获得的植株即为单倍体植株。
【小问 3 详解】
根据目的片段以及质粒上限制酶的识别位点，若要获得 pL 并连接到质粒上，可选用限制酶 HindⅢ、
BamHⅠ进行酶切，以替换 Ti 质粒中的启动子，从而达到根据 GUS 酶活性反映启动子活性的目的。根据图
c 的结果可知，交链格孢处理的每一组转基因烟草中的 GUS 酶活性都最高，可确定其诱导作用最强。欲培
育具有高抗病原微生物能力的百合新品种，可利用转基因技术将百合 B 中 L 基因的启动子替换为野生百合
中 L 基因的启动子 pL。