12.几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解.通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力.回答下列问题:
(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是 嫩叶组织细胞易破碎 .提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是 防止RNA 降解
(2)以 mRNA 为材料可以获得 cDNA,其原理是 在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA
(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是 目的基因无复制原点:目的基因无表达所需启动子 (答出两点即可)
(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是 磷酸二酯键
(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是 目的基因的转录或翻译异常
参考答案
(1) 嫩叶组织细胞易破碎 防止 RNA 降解; (2) 在逆转录酶的作用下,以 mRNA 为模板按照碱基互补配对的原则可以合成 cDNA; (3) 目的基因无复制原点:目的基因无表达所需启动子; (4) 磷酸二酯键; (5) 目的基因的转录或翻译异常