水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉所占比例越小糯性越…——2020 高考生物第 27 题答案解析

【答案】 ①. 限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶 ②. 转化 ③. RNA 聚合酶与启动子的识别和
结合 ④. 不发生 ⑤. 编码直链淀粉合成酶的碱基序列中不含启动子 ⑥. 逆转录（或：反转录）
⑦. 引物是根据 Wx 基因的一段已知序列设计合成的（或：引物能与 Wx 基因的 cDNA 特异性结合）
⑧. 品系 3 ⑨. 品系 3 的 Wx mRNA 最少，控制合成的直链淀粉合成酶最少，直链淀粉合成量最少，糯
性最强
【解析】
【分析】基因工程的操作步骤：
1、获取目的基因（从基因组文库中获取、利用 PCR 技术扩增目的基因、化学合成法） ；
2、基因表达载体的构建（这也是基因工程的核心） ；一个完整的基因表达载体包括：
（1）启动子：位于基因的首端，是RNA 聚合酶识别并结合的位点，驱动目的基因的转录； （2）目的基因：
编码蛋白质的基因； （3）终止子：位于基因的尾端，其作用使转录在需要的地方停止； （4）标记基因：作
用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。
3、将目的基因导入受体细胞（植物、动物、微生物） ：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持
稳定和表达的过程，称为转化。
4、目的基因的检测与鉴定 （DNA 分子杂交技术,分子杂交技术、抗原抗体杂交） 。
【详解】 （1）将目的基因与 Ti 质粒构建基因表达载体时，需要限制酶的切割，将目的基因插入载体时需要
DNA 连接酶的连接，重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程叫做转化。
（2） 根据以上分析可知，启动子是RNA 聚合酶识别并结合的位点，如果启动子序列改变将会影响RNA 聚
合酶与之结合和识别，进而影响基因的转录水平。在真核生物中，编码蛋白质的序列是基因中编码区，编
码区中不包括启动子序列，因此直链淀粉合成酶的基因碱基序列中不含有启动子，因此3 个突变品系中 Wx
基因中控制合成直链淀粉酶的氨基酸序列不发生改变。

（3） 以mRNA 为模板合成cDNA 的过程为逆转录，利用PCR 技术扩增 Wx 基因的 cDNA，需要以Wx 基因
合成的引物，这样引物能够在总 cDNA 中与 Wx 基因的 cDNA 特异性结合，从而利用 PCR 扩增技术专一性
扩增出 Wx 基因的cDNA。
（4） 识图分析可知，图中品系3 的 Wx 基因的 mRNA 的含量最少，那么合成的直链淀粉酶最少，直链淀粉
合成量最少，因此该水稻胚乳中含的直链淀粉比例最小，糯性最强。
【点睛】本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握基因工程的操作工具和操作步骤是解决问题的关键。
识记并理解基因工程中工具酶的种类和作用，把握基因表达载体构建的过程，理解启动子的功能和编码蛋
白质的基因的结构，这是该题考查的难点；把握 PCR 扩增技术的操作过程和引物的作用，这是突破第（3）
问的关键。