2013_省自主命题（四川）
10．（12 分）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。
图甲
图乙
（1）图甲中，过程①需要的酶有。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是
（2 ）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是；推测该同学接种时可能的操作失误是 0
（3 ）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种 菌的发酵罐需要先排气，其原因是
（4 ）用凝胶色谱法分离α 一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较
(1) 限制性核酸内切酶、DNA连接酶 淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌; (2) 稀释涂布平板法 涂布不均匀; (3) 工程酵母 工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强导致酒精发酵产生C02的速率更快; (4) 小
[答案]（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶 淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌(2) 稀释涂布平板法 涂布不均匀 （3）工程酵母 工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强导致酒精发酵产生C02的速率更快（4）小
[解析]①由题目所给信息可以直接看出，工程酵母菌比普通酵母菌利用淀粉的能力强；在以淀粉为唯一碳源的培养基上，工程酵母菌可以正常增殖，而普通酵母菌不能正常增殖。（2）图示菌体过于集中，是菌液中酵母菌分布不均造成的，应通过摇晃，使培养液中的酵母菌分布均匀。（3）在以淀粉为原料的培养液中，普通酵母菌繁殖慢：产生气体少；工程酵母菌繁殖快，产生气体多。（4）大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出。
[ 定位] 本题综合考查基因操作过程、微生物的培养、蛋白质的分离等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。