某小组为研究真菌基因 m 的功能，构建了融合表达蛋白M 和…——2021 高考生物第 23 题答案解析

A. Taq 酶最适催化温度范围为50～60℃

B. 与常规PCR 相比，热启动 PCR 可减少反应起始时引物错配形成的产物

C. 两条子链的合成一定都是从 5′端向 3′端延伸

D. PCR 产物 DNA 碱基序列的特异性体现了Taq 酶的特异性 （2）重组质粒的构建 ①将 Sma I 切开的载体 A 与添加同源序列的m 混合，用特定 DNA 酶处理形成黏性末端，然后降温以促进 ______，形成 A-m 结合体。将A-m 结合体导入大肠杆菌，利用大肠杆菌中的DNA 聚合酶及______酶等， 完成质粒的环化。 ②若正确构建的重组质粒 A—m 仍能被 Sma I 切开，则 Sma I 的酶切位点可能在______。 （3）融合蛋白的表达 ①用含有尿嘧啶的培养基培养 URA3 基因缺失型酵母，将其作为受体菌，导入质粒 A-m，然后涂布于无尿 嘧啶的培养基上，筛选获得目的菌株，其机理是______。 ②若通过抗原一抗体杂交实验检测到酵母蛋白中含 lag 标签，说明______，后续实验可借助tag 标签进行蛋 白 M 的分离纯化。