（6 分）酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分…——2009 高考生物第 31 题答案解析

31．（6 分）酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入 6 支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

<table><tr><td colspan="1" rowspan="1">试管编号项目</td><td colspan="1" rowspan="1">I</td><td colspan="1" rowspan="1">II</td><td colspan="1" rowspan="1">III</td><td colspan="1" rowspan="1">Ⅳ</td><td colspan="1" rowspan="1">V</td><td colspan="1" rowspan="1">VI</td></tr><tr><td colspan="1" rowspan="1">蒸馏水（mL）</td><td colspan="1" rowspan="1">2</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">1</td><td colspan="1" rowspan="1">1</td><td colspan="1" rowspan="1">1</td><td colspan="1" rowspan="1">1</td></tr><tr><td colspan="1" rowspan="1">缓冲液（mL）</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">2</td><td colspan="1" rowspan="1">1</td><td colspan="1" rowspan="1">0.5</td><td colspan="1" rowspan="1">0.5</td><td colspan="1" rowspan="1">0.5</td></tr><tr><td colspan="1" rowspan="1">果胶酶液（mL）</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0.5</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td></tr><tr><td colspan="1" rowspan="1">蜗牛酶液（mL）</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0.5</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td></tr><tr><td colspan="1" rowspan="1">纤维素酶液（mL）</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0</td><td colspan="1" rowspan="1">0.5</td></tr><tr><td colspan="1" rowspan="1">实验结果</td><td colspan="1" rowspan="1">1</td><td colspan="1" rowspan="1">-</td><td colspan="1" rowspan="1">-</td><td colspan="1" rowspan="1">+++</td><td colspan="1" rowspan="1">++++</td><td colspan="1" rowspan="1">++</td></tr><tr><td colspan="1" rowspan="1">(绿色深浅程度)</td><td colspan="1" rowspan="1"></td><td colspan="1" rowspan="1"></td><td colspan="1" rowspan="1"></td><td colspan="1" rowspan="1"></td><td colspan="1" rowspan="1"></td><td colspan="1" rowspan="1"></td></tr></table>

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）

（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是　为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果　，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。

（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有　果胶酶和纤维素酶　 等多种酶。该实验中　I、Ⅱ、Ⅲ　 是空白对照组，其设置意义是　排除无关变量的干扰　。

（3）用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用　等渗溶液　 洗涤。

（4）原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是　低渗涨破法　。