2015_NewCurriculum卷 (生物)
11． （15分） 已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶．脂肪酶和
油脂可用于生物柴油的生产．回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 染
色．微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 萃取法 （填“萃取法”或“水蒸
气蒸馏法”）从菌体中提取．
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作
物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 油脂 为碳源的固体培养基进行
培养．从功能上划分该培养基属于 选择性 培养基
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 血细胞计数板
直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 稀释涂布平板 法进行计数．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在
35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则
上述三个温度中， 45 ℃条件下该酶活力最小．为了进一步确定该酶的最
适温度，应围绕 40 ℃设计后续实验．
（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 萃取法
【考点】I4：微生物的利用．菁优网版权所有
【专题】114：实验性简答题；541：微生物的分离、培养和应用；542：酶的应
用；543：从生物材料提取特定成分．
【分析】 植物有效成分的提取可用蒸馏法、 压榨法或萃取法， 因为植物油不挥发，
所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取．植物油中不含矿物
质元素，只为微生物提供碳源，培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌，测定微生物
的数量，可以用显微镜直接计数或稀释涂布平板法．分离出的脂肪酶要对其
活性进行检测，以确定其实用价值．
【解答】解： （1）脂肪可被苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染成橘黄色（红色）故显微观察时，
微生物A菌体中的油脂通常可用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色．因为植物油不挥发，
所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取．
（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生
物不能生存的选择培养基，培养基中应该添加油脂作为唯一碳源．从功能上
划分该培养基属于选择性培养基．
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接
计数；若要测定其活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在
35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则
上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，该酶的最适温度为40℃左右，
为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验．
故答案为：
（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 萃取法
（2）油脂 选择性
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板
（4）45 40
【点评】 本题主要考查植物有效成分的提取等相关知识，意在考查考生的识记能
力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；
能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查．
（二） 【生物-选修3：现代生物科技专题】